1、無菌室裝修操作間潔凈度應達到10000級，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超凈臺潔凈度應達到100級。
2、無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。
3、嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用。
4、無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液。
5、無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。
6、需要帶入無菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法滅菌。
7、工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套，方可進入無菌室進行操作。
8、無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上，并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢，應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。
9、檢查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。
10、每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。
11、吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
12、接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后方可接種培養物。
13、帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時后取出沖洗。
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